摘要：泡騰消毒片過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片是一種高效廣譜消毒劑，廣泛應(yīng)用于環(huán)境消毒，但市售產(chǎn)品通常含磷較高，在應(yīng)用過程中易導(dǎo)致環(huán)境富營養(yǎng)化。本試驗(yàn)選用不含磷輔料，試制了無磷環(huán)保泡騰消毒片型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片。為了評價(jià)自制過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片的殺菌效果，采用4個(gè)不同稀釋濃度（200倍、400倍、800倍和1,600倍）對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌進(jìn)行滅殺試驗(yàn)。結(jié)果顯示：作用5min，200、400、800和1,600倍稀釋液對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌滅殺率均達(dá)99.9%以上，證明本試驗(yàn)試制的無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片具有高效、泡騰消毒片廣譜的殺菌效果。

關(guān)鍵詞：過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片；環(huán)保型；消毒效果

近年國內(nèi)外遭受非洲豬瘟和新冠病毒等帶來的疫情災(zāi)難，不論對畜牧養(yǎng)殖業(yè)還是人類健康事業(yè)都造成了嚴(yán)重影響，除疫苗外，消毒已成為養(yǎng)殖業(yè)和人類健康事業(yè)中預(yù)防和控制疾病流行的一種重要措施，人們也充分認(rèn)識到消毒環(huán)節(jié)在安全防護(hù)方面的必要性和重要性。過硫酸氫鉀復(fù)合鹽類消毒劑是一種過氧化物類高效消毒劑，具有殺滅速度快，效率高且分解無殘留等優(yōu)點(diǎn)，一般由過硫酸氫鉀復(fù)合鹽、氯化物、有機(jī)酸、無機(jī)酸、泡騰消毒片表面活性劑和軟水劑組成，其中過硫酸氫鉀復(fù)合鹽是主要活性成分。市面上過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片多含磷，在消毒應(yīng)用過程中容易導(dǎo)致環(huán)境富營養(yǎng)化，因此本研究采用無磷輔料制備過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片，并對其水溶液的消毒效果進(jìn)行評價(jià)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試劑

營養(yǎng)瓊脂，購自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司；無水硫代硫酸鈉，分析純，購自天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；無水磷酸氫二鈉、磷酸二氫、碳酸氫鈉、十二烷基苯磺酸鈉、鈉氯化鈉、氨基磺酸、無水檸檬酸、EDTA-2Na，分析純，購自國泡騰消毒片藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；過硫酸氫鉀復(fù)合鹽，購自翱圖（開封）環(huán)保科技有限公司；聚維酮K30，藥用級，購自博愛新開源醫(yī)療科技集團(tuán)股份有限公司；莧菜紅85，食品級，購自柔亞食品添加劑貿(mào)易有限公司；檸檬香精，食品級，廣州荷花香精香料有限公司。

1.2 主要儀器設(shè)備

電子天平（型號PL2002），購自梅特勒托利多公司；方錐混合機(jī)（型號HSD-5L），購自常州佳發(fā)制粒干燥設(shè)備有限公司；旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)（型號ZP-5b ），購自廣州晨雕機(jī)械設(shè)備有限公司；電子天平（型號JA2003），購自上海上平儀器有限公司；生物安全柜（型號NU-425-400S），購自美國Nuaire；電熱恒溫培養(yǎng)箱，泡騰消毒片購自上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司；全自動立式電熱壓力整齊滅菌器，購自上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；微量移液器，購自德國Ependorf公司；渦旋混合器，購自德國IKA公司。

1.3 菌株

大腸桿菌8099、金黃色葡萄球菌ATCC 6538，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

2 試驗(yàn)方法

2.1 無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片的制作方法

稱取550g過硫酸氫鉀復(fù)合鹽、15g氯化鈉、50g氨基磺酸、150g無水檸檬酸和35g乙二胺四乙酸二鈉在方錐混合機(jī)中預(yù)混，混合均勻后，再加入120g碳酸氫鈉、50g PVPK30、20g十二烷基苯磺酸鈉（LAS-80）、6g PEG4000、3g檸檬香精和1g莧菜紅總混混合30min，得到混合均勻的粉末中間體。泡騰消毒片將以上所得粉末中間體轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)，按照1.0g/片的片重規(guī)格進(jìn)行壓片，篩粉，鋁箔袋包裝，即得本次試制的無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片。

2.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)

本試驗(yàn)試制樣品的穩(wěn)定性試驗(yàn)根據(jù)2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》進(jìn)行。將包裝后的過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片置于54℃恒溫干燥箱中14d，并于放置前后取樣，對試制樣品的外觀性狀和有效氯含量進(jìn)行觀察和測定，采取隨機(jī)取樣的方式抽取3組，檢測3次并取平均值，計(jì)算并分析有效氯的含量變化。

2.2 消毒試驗(yàn)方法

將供試消毒劑分別進(jìn)行200倍、400倍、800倍和1,600倍稀釋，泡騰消毒片以大腸桿菌8099和金黃色葡萄球菌ATCC 6538為指示菌，采用消毒劑定量試驗(yàn)評價(jià)方法評價(jià)無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片水溶液的殺菌效果。

2.2.1 菌懸液的制備 取出菌種進(jìn)行復(fù)蘇，在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上劃線；接種后的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中，37℃培養(yǎng)20h。從復(fù)蘇的金黃色葡萄球菌ATCC 6538（第2代）及大腸桿菌8099（第3代）平皿上挑取單個(gè)典型菌落至PBS中，取部分菌懸液用核酸蛋白測定儀測定OD600值，將剩余菌懸液的OD600值調(diào)至0.135～0.145，按此比例調(diào)整剩余菌懸液，混合均勻后進(jìn)行2倍稀釋，各菌液濃度約為107cfu/mL，備用。

2.2.2 中和劑的選擇 選擇實(shí)驗(yàn)室已有0.5%泡騰消毒片的硫代硫酸鈉溶液作本試驗(yàn)中和劑。

2.2.3 過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片對微生物的定量殺滅試驗(yàn) 用無菌純化水將釋過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片作200倍、400倍、800倍和1,600倍稀釋，作供試消毒劑。吸取0.5mL各菌液至4.5mL不同稀釋濃度的消毒劑中混合均勻后作用5min，計(jì)時(shí)結(jié)束后取菌藥作用液0.5mL至含4.5mL中和劑中的EP管混合均勻后作用10min，計(jì)時(shí)結(jié)束后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，同時(shí)設(shè)置陽性對照組和陰性對照組。當(dāng)殺菌率達(dá)到99.9%以上時(shí)，可判定該稀釋倍數(shù)為消毒劑的有效殺菌濃度。按照下述公式計(jì)算殺菌率（Pt）。該試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行3次，以3次試泡騰消毒片驗(yàn)殺菌率的平均值表示最終殺菌率。

殺菌率（Pt）=（N0-Nt）/N0×100%，其中N0=對照組的活菌數(shù)，Nt=實(shí)驗(yàn)組的活菌數(shù)。

3 結(jié)果

3.1 樣品制備結(jié)果

采用上述制備方法，本試驗(yàn)制得了一種表面光潔，具有檸檬香氣味的淺粉紅色泡騰片。

3.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片在54℃恒溫條件下放置14d后，片子表面光潔平整、無碎片、無吸潮等現(xiàn)象發(fā)生，脆碎度和崩解時(shí)間均符合2020年版《中國藥典》片劑項(xiàng)下相關(guān)規(guī)定。3組樣品的有效氯含量檢測結(jié)果顯示，有效氯含量的下降率分別為1.5%、2.0%和1.6%，含量均未發(fā)生顯著變化，證明了鋁箔袋包裝下的無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片是穩(wěn)定的。

3.3 菌懸液制備條件摸索結(jié)果

中和劑工作菌液：大腸桿菌8099調(diào)至OD600為0.14，再進(jìn)行2倍稀釋時(shí)菌液濃度為107CFU/mL。

3.4 細(xì)菌定量試驗(yàn)結(jié)果

過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片對大腸桿菌8099及金黃色葡萄球菌ATCC 6538的定量試驗(yàn)結(jié)果見表1。由表1可知，過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片對大腸桿菌8099的有效殺菌濃度為800倍稀釋，對金黃色葡萄球菌ATCC 6538的有效殺菌濃度為800倍稀釋。

4 討論

目前市售過硫酸氫鉀復(fù)合鹽類消毒劑有兩種，粉劑和片劑，二者為同一類消毒劑，處方組成相似，均含磷酸鈉鹽。研究表明，水溶性正磷泡騰消毒片酸鹽能夠被植物和微生物等直接利用，是引起富營養(yǎng)化的主要原因之一。本研究試制了一種無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片，通過測定加速條件下有效氯含量來驗(yàn)證過無磷環(huán)保型硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片的穩(wěn)定性。過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片的殺菌原理主要是過硫酸氫鉀復(fù)合鹽的氧化能力，即過硫酸氫鉀可以氧化氯離子，產(chǎn)生次氯酸，氫離子和活性氧，氧化能力以有效氯含量表示。因此，在本研究中通過測定有效氯含量的穩(wěn)定性來證明過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片的穩(wěn)定性。

本次研制的無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片對常見的大腸桿菌8099和金黃色葡萄球菌ATCC 6538具有非常好的殺滅效果，在800倍稀釋濃度下5min可完全滅殺，證明這種無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片具有很好的殺菌效果。

綜上所述，本研究研制的無磷環(huán)保型過硫酸氫鉀復(fù)合鹽泡騰片具有環(huán)保、穩(wěn)定、高效、廣譜的特點(diǎn)，可以廣泛應(yīng)用于各種環(huán)境場所的環(huán)境消毒。

參考文獻(xiàn)：略

作者：師夢超/洛陽惠中獸藥有限公司

來源：《中國動物保健》2021年8月刊